Abstracto
Las impurezas del ADN pueden afectar la seguridad de los productos farmacéuticos genéticamente modificados; por lo tanto, durante la autorización de comercialización se les debe fijar un valor límite específico. Esto se aplica especialmente a las vacunas de ARNm, ya que para su producción se utilizan grandes cantidades de plantillas de ADN. Además, al cuantificar el contenido total de ADN en el producto final, debemos observar que, además del ingrediente activo ARNm, las impurezas del ADN también están encerradas en nanopartículas lipídicas y, por lo tanto, son difíciles de cuantificar. De hecho, el fabricante de la vacuna de ARNm Comirnaty (BioNTech/Pfizer) solo mide las impurezas del ADN en la sustancia activa mediante una reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa (qPCR), cuya secuencia objetivo de ADN es menos del 1% del ADN añadido originalmente. plantilla. Esto significa que no se realiza ninguna cuantificación directa del ADN y el cumplimiento del valor límite de contaminación del ADN solo se estima a partir de los datos de qPCR mediante métodos de extrapolación matemática. Sin embargo, también es posible disolver las nanopartículas lipídicas con un detergente para medir directamente la contaminación del ADN en el producto final mediante métodos espectroscópicos de fluorescencia. Las pruebas experimentales de este enfoque confirman que de esta manera se pueden obtener valores fiables.
Fuente:
König, B.; Kirchner, J.O. Methodological Considerations Regarding the Quantification of DNA Impurities in the COVID-19 mRNA Vaccine Comirnaty®. Methods Protoc. 2024, 7, 41. https://doi.org/10.3390/mps7030041