Resistencia al remdesivir
El análogo de nucleósido remdesivir (RDV) es un pilar del tratamiento para la infección por SARS-CoV-2; sin embargo, no está claro cómo el SARS-CoV-2 podría desarrollar resistencia al RDV. En este trabajo, Stevens et al. realizaron pases seriados del SARS-CoV-2 en presencia de concentraciones crecientes de GS-441524, el nucleósido original del RDV. Descubrieron que dos mutaciones en la proteína 12 ARN polimerasa dependiente del ARN del SARS-CoV-2 ( nsp12 -RdRp), S759A y V792I, mediaban la resistencia al RDV. Los autores validaron el papel de estas mutaciones en la mediación de la resistencia al RDV insertándolas en el gen nsp12 de otro coronavirus, el virus de la hepatitis murina. El análisis de más de 6 millones de secuencias nsp12 del SARS-CoV-2 demostró que estas mutaciones eran raras o no se detectaban. En conjunto, estos datos demuestran cómo puede surgir la resistencia al RDV.
Abstracto
El análogo de nucleósido remdesivir (RDV) es un antiviral aprobado por la Administración de Alimentos y Medicamentos para el tratamiento de las infecciones por coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo (SARS-CoV-2). Por lo tanto, es fundamental comprender los factores que promueven o previenen la resistencia al RDV. Pasamos el SARS-CoV-2 en presencia de concentraciones crecientes de GS-441524, el nucleósido original del RDV. Después de 13 pases, aislamos tres linajes virales con resistencia fenotípica definida por aumentos en la concentración efectiva máxima media de 2,7 a 10,4 veces. El análisis de secuencia identificó mutaciones no sinónimas en la ARN polimerasa dependiente de ARN de la proteína 12 no estructural ( nsp12 -RdRp): V166A, N198S, S759A, V792I y C799F/R. Dos linajes codificaron la sustitución S759A en el motivo activo RdRp Ser 759 -Asp-Asp. En un linaje, la sustitución V792I surgió primero y luego se combinó con S759A. La introducción de las sustituciones S759A y V792I en posiciones homólogas de nsp12 en el virus de la hepatitis murina demostró transferibilidad entre betacoronavirus; la introducción de estas sustituciones resultó en una resistencia al RDV de hasta 38 veces y un defecto de replicación. El análisis bioquímico de la RdRp del SARS-CoV-2 que codifica S759A demostró una preferencia aproximadamente 10 veces menor por el trifosfato de RDV (RDV-TP) como sustrato, mientras que nsp12 -V792I disminuyó la concentración de trifosfato de uridina necesaria para superar la inhibición dependiente de la plantilla asociada con RDV. Las sustituciones seleccionadas in vitro identificadas en este estudio fueron poco frecuentes o no se detectaron en los más de 6 millones de secuencias de consenso nsp12 -RdRp disponibles públicamente en ausencia de selección por RDV. Los resultados definen las vías genéticas y bioquímicas de la resistencia al RDV y enfatizan la necesidad de estudios adicionales para definir el potencial de aparición de estas u otras mutaciones de resistencia al RDV en entornos clínicos.
Fuente:
Laura J. Stevens et al,Mutations in the SARS-CoV-2 RNA-dependent RNA polymerase confer resistance to remdesivir by distinct mechanisms.Sci. Transl. Med.14,eabo0718(2022).DOI:10.1126/scitranslmed.abo0718