Los ARNm transcritos in vitro (IVT) son modalidades que pueden combatir enfermedades humanas, ejemplificadas por su uso como vacunas para el coronavirus 2 de la neumonía asiática (SARS-CoV-2). Los ARNm de IVT se transfectan en células diana, donde se traducen en proteína recombinante y la actividad biológica o inmunogenicidad de la proteína codificada ejerce un efecto terapéutico previsto. Los ribonucleótidos modificados se incorporan comúnmente en los ARNm de IVT terapéuticos para disminuir su inmunogenicidad innata, pero sus efectos sobre la fidelidad de la traducción del ARNm no se han explorado completamente. Aquí demostramos que la incorporación de N 1 -metilpseudouridina en el ARNm da como resultado un cambio de marco ribosómico +1 in vitro y que la inmunidad celular en ratones y humanos a productos con cambio de marco +1 de la traducción del ARNm de la vacuna BNT162b2 se produce después de la vacunación.
El cambio de marco del ribosoma +1 observado es probablemente una consecuencia del estancamiento del ribosoma inducido por N 1 -metilpseudouridina durante la traducción del ARNm de IVT, con un cambio de marco que se produce en secuencias resbaladizas del ribosoma. Sin embargo, demostramos que la focalización sinónimo de secuencias tan resbaladizas proporciona una estrategia efectiva para reducir la producción de productos con desplazamiento de marco. En general, estos datos aumentan nuestra comprensión de cómo los ribonucleótidos modificados afectan la fidelidad de la traducción del ARNm, y aunque no se han informado resultados adversos por la traducción errónea de las vacunas contra el SARS-CoV-2 basadas en ARNm en humanos, estos datos resaltan posibles efectos no deseados para futuras terapias basadas en ARNm y demostrar el requisito de optimización de secuencia.
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